Sigma試劑:藥典重組胰蛋白酶,T8802-50MG

屬性：

質(zhì)量水平：200

無菌性：aseptically filled

形式：essentially salt-free, lyophilized powder

specific activity：≥10,000 BAEE units/mg protein

分子量：23.8 kDa

組成：protein, ≥95%

溶解性：hydrochloric acid: soluble 1 mM, clear

異質(zhì)活性：Chymotrypsin ≤0.1 BTEE units/mg protein

儲(chǔ)存溫度：?20°C

一般描述：

胰蛋白酶分子有兩個(gè)結(jié)構(gòu)域：一個(gè)與酶活性位點(diǎn)和色氨酸殘基有關(guān)；另一個(gè)與8-苯胺基萘-1-磺酸鹽結(jié)合有關(guān)。

應(yīng)用：

對(duì)于胰蛋白酶消化肽，胰蛋白酶：肽 使用約為 1：100 至 1:20 的比例。從培養(yǎng)表面除去粘附細(xì)胞是本產(chǎn)品的一個(gè)典型應(yīng)用。 從其底物中去除細(xì)胞所需的胰蛋白酶濃度主要取決于細(xì)胞類型和培養(yǎng)物的年齡。 胰蛋白酶也被用于細(xì)胞培養(yǎng)期間細(xì)胞的再懸浮、蛋白質(zhì)組學(xué)研究中的蛋白質(zhì)消化和各種凝膠內(nèi)消化。 其他應(yīng)用包括：通過基于膜的技術(shù)評(píng)估結(jié)晶，用在確定動(dòng)力學(xué)陷阱的存在會(huì)限制蛋白質(zhì)的折疊速率和產(chǎn)量的一項(xiàng)研究中。

胰蛋白酶可使貼壁細(xì)胞從組織培養(yǎng)板上脫落，以用于傳代。胰蛋白酶用于研究評(píng)估大分子群集對(duì)人α-乳清蛋白結(jié)構(gòu)穩(wěn)定性的影響。 胰蛋白酶也用于研究哈茨木霉分泌組的BN-PAGE分析。

生化/生理作用：

胰蛋白酶切割賴氨酸和精氨酸殘基的 C 端肽。 如果酸性殘基位于切割位點(diǎn)的任一側(cè)，則該反應(yīng)的水解速度減慢，并且如果脯氨酸殘基位于切割位點(diǎn)的羧基側(cè)，則停止水解。 胰蛋白酶活性的最適 pH 為 7-9。 胰蛋白酶還可以起到裂解氨基酸合成衍生物的酯和酰胺鍵的作用。 將 EDTA 作為螯合劑添加到胰蛋白酶溶液中，用于中和鈣離子和鎂離子，這些離子遮蔽胰蛋白酶作用的肽鍵。 去除這些離子會(huì)增加酶活性。

絲氨酸蛋白酶抑制劑，包括 DFP、TLCK、APMSF、AEBSEF 和抑肽酶等，將抑制胰蛋白酶。

單位定義：

在25℃、pH 7.6條件下，使用BAEE作為底物，一單位BAEE每分鐘可產(chǎn)生0.001的ΔA253 。反應(yīng)體積= 3.2 ml（1 cm光程）。

使用 BAEE 作為底物，一個(gè) BAEE 單元，將在 pH 7.6，25℃ 下，每分鐘產(chǎn)生 0.001 的 A253。

制備說明：

TPCK處理

分析說明：

E1%/280法測(cè)定蛋白

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      試劑盒：ELISA試劑盒、免疫組化試劑盒、分子生物學(xué)試劑盒、細(xì)胞凋亡試劑盒

      細(xì)胞培養(yǎng)：血清，培養(yǎng)基、胰酶、雙抗等

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