10099-141C胎牛血清源自澳大利亞來(lái)源、經(jīng)嚴(yán)格檢疫的健康牛群,適用于多種哺乳動(dòng)物細(xì)胞的培養(yǎng)。其富含生長(zhǎng)因子、激素、貼壁因子及營(yíng)養(yǎng)物質(zhì),對(duì)細(xì)胞增殖、分化與功能維持至關(guān)重要。若使用不當(dāng),易因反復(fù)凍融、污染引入或熱滅活誤操作,導(dǎo)致批次失效、細(xì)胞狀態(tài)異常甚至實(shí)驗(yàn)失敗。
10099-141C胎牛血清應(yīng)遵循冷鏈保存、無(wú)菌操作、科學(xué)解凍、合理滅活的原則,才能發(fā)揮生物學(xué)效能。
一、儲(chǔ)存與解凍
長(zhǎng)期儲(chǔ)存:
未開(kāi)封血清應(yīng)置于–20℃以下超低溫冰箱,避免頻繁開(kāi)關(guān)門導(dǎo)致溫度波動(dòng);
解凍操作:
提前將血清轉(zhuǎn)移至4℃冰箱緩慢解凍,隨后在室溫下輕柔搖勻;嚴(yán)禁37℃水浴快速融化,以防蛋白變性或沉淀形成;
分裝建議:
按單次用量(如50mL)分裝至無(wú)菌離心管,避免反復(fù)凍融。
二、熱滅活
目的:
滅活補(bǔ)體系統(tǒng)(56℃,30分鐘),適用于免疫細(xì)胞、干細(xì)胞或敏感原代細(xì)胞培養(yǎng);
風(fēng)險(xiǎn)提示:
熱滅活會(huì)降低部分生長(zhǎng)因子活性,并可能產(chǎn)生絮狀沉淀;多數(shù)常規(guī)細(xì)胞系;
操作規(guī)范:
解凍后血清置于56℃水浴,定時(shí)輕搖,嚴(yán)格計(jì)時(shí)30分鐘,立即冰浴終止反應(yīng)。
三、無(wú)菌操作與配制
工作環(huán)境:
在生物安全柜內(nèi)操作,所有耗材(移液管、瓶口)經(jīng)75%乙醇消毒;
培養(yǎng)基配制:
將血清緩慢加入基礎(chǔ)培養(yǎng)基中,輕柔顛倒混勻,避免劇烈震蕩產(chǎn)生氣泡;
過(guò)濾除菌(可選):
對(duì)高敏感實(shí)驗(yàn),可使用0.22μm濾器過(guò)濾血清,但可能損失部分大分子因子。
四、質(zhì)量監(jiān)控與記錄
外觀檢查:
正常血清呈透明淡黃色,允許微量脂質(zhì)沉淀(4℃靜置后可見(jiàn)),若渾濁、變紅或大量絮狀物,疑為污染或變質(zhì);
批次驗(yàn)證:
新批次使用前,建議進(jìn)行小規(guī)模細(xì)胞生長(zhǎng)曲線測(cè)試,確認(rèn)兼容性;
溯源管理:
記錄貨號(hào)、批號(hào)、解凍日期及使用項(xiàng)目,確保實(shí)驗(yàn)可重復(fù)。